A newly developed precise and sensitive radioimmunoassay for clonidine
Creators
- 1. Boehringer (C.H.) Sohn, Ingelheim (Germany, F.R.). Abt. Biochemie
- 2. Boehringer (C.H.) Sohn, Ingelheim (Germany, F.R.). Abt. Pharmachemie
Description
A new precise and sensitive radioimmunoassay for clonidine has been developed. Synthesis and analysis of the hapten (4-carboxy-clonidine; St 1984) as well as antibody production in rabbits are described in detail. At a final dilution of 1:1000 the resulting immune serum binds 50% of a tritiated clonidine standard containing 1 ng of clonidine. The detection limit of the presented radioimmunoassay for clonidine is 0.1 ng/ml. The coefficient of variation did not exceed 4.3% for any of 7 standard determinations with 5 replicates. There was no relevant crossreactivity of inactive clonidine metabolites apart from 4-OH-clonidine. To avoid any errors from cross-reaction clonidine was selectively and quantitatively extracted into diethylether from unknown plasma samples. Following concentration of the extracts even such low concentrations as 20 pg of clonidine/ml plasma were detectable. With the radioimmunoassay applied in pharmacokinetic studies a maximal clonidine concentration in blood plams of healthy human volunteers was determined to 0.6 ng/ml 1.5 h after oral administration of 150 μg. (orig.)
Abstract (German)
Die Entwicklung eines empfindlichen und genauen Radioimmunoassays fuer Clonidin. Ein neuer empfindlicher Radioimmunoassay fuer Clonidin wurde entwickelt, der sehr zuverlaessige Bestimmungen des Wirkstoffs im Blutplasma ermoeglicht. Die Synthese und Analyse des Haptens (4-Carboxy-clonidin, St 1984) wie auch die Antikoerperproduktion im Kaninchen werden ausfuehrlich beschrieben. Das 1:1000 verduennte Antiserum bindet 50 % eines tritiierten Clonidinstandards, der 1 ng des Wirkstoffs enthaelt. Die untere Nachweisgrenze des vorgestellten Radioimmunoassays liegt bei 0,1 ng/ml. Die aus 5 Parallelansaetzen ermittelten Variationskoeffizienten ueberschreiten bei keiner der 7 Standardkonzentrationen den Wert von 4,3%. Abgesehen von 4-Hydroxy-clonidin zeigte keiner der Clonidinmetaboliten eine nennenswerte Kreuzreaktion mit dem Antikoerper. Zur Vermeidung von Messfehlern aufgrund der Kreuzreaktion wurde Clonidin aus unbekannten Plasmaproben quantitativ und selektiv in Diaethylaether extrahiert. Infolge fuenffacher Konzentrierbarkeit der Extrakte liessen sich somit noch Clonidinkonzentrationen von 20 pg/ml Blutplasma erfassen. Bei pharmakokinetischen Untersuchungen an gesunden Probanden fanden wir mit Hilfe des Radioimmunoassays maximale Clonidinspiegel von 0,6 ng/ml 1,5 h nach oraler Gabe von 150 μg Clonidin. (orig.)Additional details
Publishing Information
- Journal Title
- Arzneim.-Forsch.
- Journal Volume
- 29
- Journal Issue
- 3
- Series
- Arzneim.-Forsch.
- Journal Page Range
- 532-538
- ISSN
- 0004-4172
INIS
- Country of Publication
- Germany
- Country of Input or Organization
- Germany
- INIS RN
- 10487675
- Subject category
- S62: RADIOLOGY AND NUCLEAR MEDICINE;
- Descriptors DEI
- ACCURACY; ANTIBODIES; ANTIGENS; BLOOD SERUM; PATIENTS; PHARMACOLOGY; RADIOIMMUNOASSAY; SENSITIVITY; SYMPATHOMIMETICS
- Descriptors DEC
- DRUGS; ISOTOPE APPLICATIONS; TRACER TECHNIQUES