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AbstractAbstract
[en] Plant response and adaptation to metallic stress are involving numerous mechanisms limiting the toxic effect of metals. Although a large number of these mechanisms are well characterized, many processes are in need to be identified in order to have a better understanding of strategies involved in plant response to toxic elements. In first instance, we investigated the role of two post-translational modifications, phosphorylation and methylation of non-histone proteins in response to stress induced by two toxic metals, cadmium and uranium. We analyzed the dynamic of these modifications in three species of Arabidopsis: A. thaliana, A. lyrata two species sensitive to cadmium and A. halleri, a species which naturally tolerate and hyperaccumulate toxic metals in her leaves. By using Western blots and mass spectrometry in parallel, we showed that lysine methylation pattern were changing during metallic stresses. Next, we analyzed the gene expression of enzymes involved in phosphorylation and lysine methylation processes in plants exposed to different adverse conditions. These analyses showed that numerous kinases expressions were differentially regulated in response to metallic stress. Concerning protein lysine methyltransferases, only a few enzymes were differentially regulated. Finally, through a mutant genetic screening we identified two genes coding for protein lysine methyltransferases involved in tolerance to a stress induced by cadmium. Secondly, we studied the physiological and cellular processes involved in the response of A. thaliana root system to uranium. Through the utilization of several reporters and the measure of physiological parameters, we demonstrated that the root architecture was strongly modulated in response to a stress induced by uranium and that in a dose dependent manner. These effects are linked to a cell cycle inhibition and the synthesis and accumulation of reactive oxygen species and nitric oxide which participated in the root apex cell death. These changes were associated with perturbation in auxin transport and distribution at the root apex and were temporally correlated to the deposition of defense polymers (callose and lignin) involved in cell proofing and cell wall stiffness. This study is confirming the fact that uranium induced stress is intimately linked to a disruption of phosphate and iron homeostasis. Furthermore, uranium-signaling cascade are sharing a part of the phosphate starvation-signaling cascade. Together, these two studies are revealing mechanisms involved in plant response and adaptation to metallic trace elements through the thin tuning of non-histone methylation and the identification of cellular process involved in the toxicity of uranium in roots. (author)
[fr]
La reponse et l'adaptation des plantes a un stress metallique mettent en jeu de nombreux mecanismes afin de limiter les effets nefastes des elements toxiques. Bien que certains de ces mecanismes soient bien caracterises, de nombreux acteurs cellulaires et moleculaires restent a identifier pour mieux comprendre la diversite des strategies mises en oeuvre dans ces processus complexes et vitaux pour les plantes. Dans un premier temps, nous nous sommes interesses au role de deux modifications post-traductionnelles, la phosphorylation et la methylation des proteines non-histone dans la reponse a un stress induit par deux elements non essentiels et toxiques, le cadmium (Cd) et l'uranium (U). Nous avons analyse la dynamique de ces modifications chez trois especes du genre Arabidopsis: A. thaliana et A. lyrata, deux especes sensibles au Cd, et A. halleri, espece naturellement capable de tolerer et d'hyper-accumuler ce metal toxique dans ses feuilles. En utilisant une combinaison d'analyses par Western blot et par spectrometrie de masse nous avons montre que les patterns de methylation des proteines changent au cours de stress metalliques. Puis, nous avons analyse l'expression des genes codant les enzymes impliquees dans les reactions de phosphorylation et methylation des proteines dans differentes conditions de stress. Ces analyses ont montre qu'un grand nombre de proteines kinases sont regules au niveau transcriptionnel par un stress metallique tandis que seules quelques une en ce qui concerne la methylation. Pour finir, nous avons mis en place un criblage genetique de mutants d'A. thaliana et identifie deux genes codant des proteines lysine methyltransferases impliques dans la tolerance au Cd. Dans un deuxieme temps, nous avons etudie les mecanismes cellulaires de la reponse du systeme racinaire d'A. thaliana lors d'une exposition a l'U. L'utilisation de differents systemes rapporteurs et la mesure de differents parametres physiologiques nous ont permis de mettre en evidence que l'architecture racinaire est fortement modulee en reponse a l'U et ceci de facon dose dependante. Cet effet est lie a l'inhibition du cycle cellulaire et a la synthese d'especes reactives de l'oxygene et d'oxyde nitrique dont l'accumulation provoque la mort cellulaire. Ces changements sont associes a une perturbation du transport et de la distribution de l'auxine dans les racines. Ces evenements sont temporellement correles avec l'accumulation de polymeres de defense (callose et lignine) impliques dans l'impermeabilisation des cellules et des parois. Cette etude confirme enfin que le stress induit par l'U est intimement lie a une perturbation de l'homeostasie de certains macronutriments (phosphate et fer) et partage les cascades de signalisation d'une carence en phosphate. Ce travail met en evidence des mecanismes de reponse et d'adaptation aux metaux toxiques a travers la regulation fine des phenomenes de methylation des proteines non-histone et l'identification de processus cellulaires impliques dans la reponse a la toxicite de l'U dans le systeme racinaire.Original Title
Etude de mecanismes cellulaires et moleculaires impliques dans la reponse et l'adaptation d'Arabidopsis a des stress metalliques: dynamique de modifications post-traductionnelles au cours d'un stress cadmium et effets de l'uranium sur le systeme racinaire
Primary Subject
Secondary Subject
Source
10 Oct 2018; 243 p; 529 refs.; Available from the INIS Liaison Officer for France, see the INIS website for current contact and E-mail addresses; Biologie Vegetale
Record Type
Report
Literature Type
Thesis/Dissertation
Report Number
Country of publication
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