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AbstractAbstract
[en] An assay has been established, based on antibodies against the N-terminal part of the ACTH molecule with a high affinity, a detection limit of 2 pg ACTH when assaying 200 ul unextracted plasma, and implying a total incubation time of three days. The antibody has been obtained by immunizing guinea-pigs with synthetic human 1-24 ACTH coupled to bovine serum albumin. The selected antibody has an equilibrium constant of 4 x 1011 litres/mole in a final dilution of 1/320.000. The antiserum reacts with synthetic human 1-39 ACTH as well as with synthetic human 1-24 ACTH, and the hormonally inactive synthetic human 11-24 ACTH fragment as well as alpha- and beta-melanocyte-stimulating hormones do not cross-react in the assay. The interassay coefficient of variation of replicate estimates was 11-13%. The reproducibility of the standard curve have been evaluated by calculating the amount of ACTH corresponding to 5% of the (B/T)o value, 1.2+-0.4 pg ACTH/tube+-SD and 50% of (B/T)o value, 15.7+-2.6 pg ACTH/tube+-SD. Validation of the assay has been obtained by assaying samples from patients with verified adrenal disorders, and the accuracy is supported by ACTH determinations in test, where metyrapon had been administered intravenously. A stimulation of ACTH production by insulin-induced hypoglycaemia has been found as well. Special attention is always paid as to the conditions for the blood sampling. A reference interval of 10-76 ng/l has been found (115 normal subjects). (orig.)
[de]
Auf der Basis von Antikoerpern des N-Terminalanteils des ACTH-Molekuels wurde ein Test entwickelt, der sich durch hohe Affinitaet, eine Nachweisgruppe von 2 pg ACTH bei 200 μl nicht extrahiertem Plasma und eine Gesamt-Inkubationszeit von 3 Tagen auszeichnet. Der Antikoerper wurde durch Immunisierung von Meerschweinchen mit synthetischem, an Rinderserumalbumin gekoppeltem, menschlichem 1-24 ACTH gewonnen. Der gewaehlte Antikoerper hat eine Gleichgewichtskonstante von 4 x 1011 l/mol in einer endgueltigen Loesung von 1/320.000. Das Antiserum reagiert mit synthetischem menschlichem 1-24 ACTH; das hormonell inaktive synthetische menschliche 11-24 ACTH-Fragment sowie das α- und β-melanozytstimulierende Hormon zeigen im Test keine Kreuzreaktion. Der Interassay-Variationskoeffizient fuer die Replikatschaetzungen betrug 11-13%. Die Reproduzierbarkeit der Standardkurve wurde durch Berechnung des ACTH-Werts ermittelt, der 5% des (B/T)o-Wertes, 1.2+-0.4 pg ACTH/Roehre +-SD und 50% des (B/T)o-Wertes, 15.7+-2.6 pg ACTH/Roehre+-SD entsprach. Der Test wurde ueberprueft, indem man Proben von Patienten mit gesicherten Nebennieren-Erkrankungen untersuchte; die Genauigkeit wird durch ACTH-Bestimmung in einem Test mit i.v.-Verabreichung von Metapyron ueberprueft. Gleichzeitig wurde eine Stimulation der ACTH-Produktion durch insulininduzierte Hypoglykaemie festgestellt. Besondere Aufmerksamkeit gilt den Bedingungen fuer die Blutprobenahme. Es wurde ein Referenzintervall von 10-76 ng/l festgestellt (115 gesunde Testpersonen). (orig./AJ)Primary Subject
Source
1977; 7 p; International symposium on radioimmunoassay and related procedures in medicine; Berlin, Germany, F.R; 31 Oct - 4 Nov 1977; IAEA-SM--220/38; 8 figs.; 2 tabs.; 23 refs.
Record Type
Miscellaneous
Literature Type
Conference
Report Number
Country of publication
ANIMALS, BETA DECAY RADIOISOTOPES, BIOLOGICAL MATERIALS, BLOOD, BODY FLUIDS, DAYS LIVING RADIOISOTOPES, ELECTRON CAPTURE RADIOISOTOPES, HORMONES, INTERMEDIATE MASS NUCLEI, IODINE ISOTOPES, ISOTOPE APPLICATIONS, ISOTOPES, MAMMALS, MEDICINE, NUCLEI, ODD-EVEN NUCLEI, PEPTIDE HORMONES, PITUITARY HORMONES, PRIMATES, RADIOISOTOPES, TRACER TECHNIQUES, VERTEBRATES
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